Diagramas de dispersión
En esta sección encontrarás una explicación de los diagramas de dispersión (también llamados scatter o scatterplots) procedentes de la serie Sysmex XN/XR, con énfasis en los canales WDF, WNR y RET. Los scatterplots constituyen la base del análisis diferencial de leucocitos y ofrecen una visión visual de las poblaciones celulares y sus alteraciones.
Los diagramas de dispersión son una herramienta potente para el cribado de células sanguíneas. Los patrones son sensibles, pero no completamente específicos y pueden diferir de los ejemplos mostrados en estas páginas. Interprete siempre el gráfico junto con la morfología y otros parámetros de laboratorio.
Medición
En el Sysmex XN, las células se analizan mediante citometría de flujo. Tras la adición de reactivos específicos, las células se fijan, se lisan o se tiñen según el canal. Posteriormente, las células individuales atraviesan un haz láser, donde se miden múltiples propiedades físicas:
- Forward scatter (FSC) – relacionado con el tamaño celular
- Side scatter (SSC) – relacionado con la complejidad interna
- Side fluorescence (SFL) – relacionado con el contenido de ácidos nucleicos
Forward Scatter
El FSC es una medida del tamaño celular: valores más altos de FSC indican células más grandes, mientras que valores más bajos indican células más pequeñas. Las plaquetas presentan el FSC más bajo, mientras que los monocitos, los linfocitos plasmocitoides y algunos blastos se encuentran entre las células de mayor tamaño.
FSC bajo
FSC alto
Side Scatter
La complejidad celular está determinada principalmente por la presencia de estructuras intracelulares como los gránulos. En menor medida, también influyen la forma del núcleo (lobulación) y la presencia de vacuolas. En el canal WDF del Sysmex, los eosinófilos presentan un SSC más alto de lo habitual debido al efecto del reactivo sobre su granulación.
SSC bajo
SSC alto
Side Fluorescence
La señal SFL refleja el contenido de ácidos nucleicos de las células. Las células con SFL elevado contienen más ARN y/o ADN, lo que suele indicar mayor actividad o proliferación. Existe una correlación limitada entre SFL y FSC; aunque las células más grandes suelen presentar mayor SFL, pueden observarse excepciones como blastos con SFL relativamente bajo o linfocitos activados con SFL elevado a pesar de su menor tamaño.
SFL bajo
SFL alto
Densidad
La densidad de puntos en un diagrama de dispersión refleja el número de células con características físicas y de fluorescencia similares. El diagrama no solo muestra la presencia de poblaciones celulares, sino también su tamaño relativo y homogeneidad.
- Una alta densidad de puntos indica una población celular grande y relativamente homogénea
- Patrones difusos o dispersos pueden sugerir heterogeneidad, activación o la presencia de células anormales
- Desplazamientos, ensanchamiento o superposición entre poblaciones suelen ser indicios tempranos de morfología anormal o de tipos celulares poco frecuentes
La imagen muestra, de izquierda a derecha, un aumento progresivo de la difusión y la densidad. Se observa primero una población de baja densidad, seguida de una densidad media con un patrón difuso normal, luego un ligero aumento de la difusión, posteriormente una difusión marcada (extrema) y finalmente una población con densidad muy alta.
